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Birds of Indian Subcontinent

Specific Detection and Typing of Mycoplasma synoviae Strains in Poultry with PCR and DNA Sequence Analysis Targeting the Hemagglutinin Encoding Gene vlhA

Publication Type:Journal Article
Year of Publication:2004
Authors:Hong, Y, García, M, Leiting, V, Benčina, D, Dufour-Zavala, L, Zavala, G, Kleven, SH
Journal:Avian Diseases
Volume:48
Issue:3
Date Published:2004
ISBN Number:00052086
Keywords:Meleagris, Meleagris gallopavo, Phasianidae
Abstract:Mycoplasma synoviae is a major pathogen of chickens and turkeys, causing economic losses to the poultry industry worldwide. In this study, we validated and applied polymerase chain reaction (PCR) and DNA sequence analysis on the N-terminal end of the hemagglutinin encoding gene vlhA as an alternative for the detection and initial typing of field strains of M. synoviae in commercial poultry. PCR primers were tested against isolates of M. synoviae from various sources along with other avian mycoplasma and other bacterial species. The vlhA gene-targeted PCR assay was highly specific in the identification of M. synoviae, with a detection limit of 4.7× 102 color changing units /ml. DNA sequence analysis of amplified products was also conducted to validate the potential for typing M. synoviae strains using the N-terminal region of the vlhA gene. To evaluate the test, we applied the PCR assay to tracheal swabs collected from chickens challenged with M. synoviae strain K1968 and compared the results to the serologic detection. The PCR assay was also evaluated directly on tracheal samples collected from commercial layers. Overall, this vlhA gene-targeted PCR is a useful tool for detection and initial typing of M. synoviae and can be applied in the preliminary identification of M. synoviae isolates directly from clinical samples. /// El Mycoplasma sinoviae es un patógeno importante para los pollos y pavos, que causa pérdidas a la industria avícola mundialmente. En este estudio se aplicó la reacción en cadena de la polimerasa (de las siglas en Inglés PCR) y el análisis de las secuencias de ADN de la región amino terminal del gen vlhA que codifica para la hemoaglutinina. Esta prueba se instrumentó como una alternativa para la detección y tipificación inicial de cepas de campo de M. synoviae en la avicultura comercial. Los iniciadores para la PCR se probaron contra varios aislamientos de M. synoviae provenientes de diversas fuentes junto con otros mycoplasmas y otras especies bacterianas. La PCR dirigida para el gen vlhA fue altamente específica para la identificación de M. synoviae, con un límite de detección de 4.7× 102 unidades de cambio de color por ml. También se realizó el análisis de las secuencias de ADN de los productos amplificados para validar el potencial de tipificar las cepas de M. synoviae usando la región amino terminal del gen vlhA. Para evaluar la prueba, se aplicó la prueba de PCR en muestras de hisopos traqueales tomados de pollos desafiados con la cepa K1968 de M. synoviae y los resultados se compararon con la detección serológica. La prueba de PCR también se evaluó directamente en muestras de tráquea tomadas de gallinas ponedoras comerciales. Por todo lo anterior se concluye que la PCR dirigida al gen vlhA es un método útil para la detección y tipificación inicial de M. synoviae y puede ser aplicada en la identificación preliminar de aislamientos de M. synoviae directamente de muestras clínicas.
URL:http://www.jstor.org/stable/1593513
Short Title:Avian Diseases
Taxonomic name: 
Scratchpads developed and conceived by (alphabetical): Ed Baker, Katherine Bouton Alice Heaton Dimitris Koureas, Laurence Livermore, Dave Roberts, Simon Rycroft, Ben Scott, Vince Smith