AVIS-IBIS

Birds of Indian Subcontinent

Determination of Optimal Conditions for Thawing and Diluting Cell-Bound CVI 988 Marek's Disease Vaccine and Stability of the Diluted Vaccine

Publication Type:Journal Article
Year of Publication:2007
Authors:Geerligs, HJ, Hoogendam, A
Journal:Avian Diseases
Volume:51
Issue:4
Date Published:2007
ISBN Number:00052086
Keywords:Meleagris, Meleagris gallopavo, Pavo, Phasianidae
Abstract:The cell-associated vaccine strain CVI 988, which is the active component of several commercial Marek's disease vaccines, normally is frozen and stored in liquid nitrogen. In order to ascertain good efficacy of the vaccine, it is crucial that the right procedures are followed for thawing and diluting of the virus. In the study presented here, ampoules containing the frozen product were taken from storage in liquid nitrogen and were thawed in a water bath at 27 C, which is similar to a lukewarm bath, and in a water bath at 37 C, with and without agitation. The effect of the thawing procedure on the live virus titer of the vaccine was investigated. Samples of thawed vaccine were diluted in diluent with different temperatures, and live virus titers were determined directly after dilution and after incubation of the diluted vaccine at different temperatures. The results show that directly after thawing in the water baths at 27 C and 37 C, with or without agitation, the live virus titers for CVI 988 were all in the same range. After incubation of the thawed virus at both temperatures for 15 min, the live virus titers were still in the same range. Decreases in live virus titers were observed after incubation for 4 hr. Live virus titration of the vaccine in diluent in different temperatures revealed that the highest titers were found with diluent at a temperature of 30 C to 37 C and the lowest titers in diluent at a temperature of 5 C. In addition, a combination product containing cell-associated CVI 988 and cell-associated herpesvirus of turkeys (HVT) was tested. For this combination product, the titers for HVT also were highest in diluent with a high temperature (i.e., 37 C), whereas the titers for CVI were highest in diluent at a temperature of 22 C. Both strains had relatively low titers in diluent at 5 C. After incubation of the diluted vaccine at the various temperatures for several hours, again, live virus titrations were done. Live virus titers were most stable with diluent at temperatures of 22 C. Vaccine virus diluted in diluent at 37 C could be stabilized by placing the diluted vaccine at 5 C directly after diluting. After evaluation of these data, the following is recommended. For thawing of the vaccine, a water bath at approximately 27 C, which is similar to a lukewarm bath, is preferred. For diluting the vaccine, diluent should be used at a temperature of 22 C or higher. If diluted in diluent at temperatures higher than 22 C, the diluted vaccine should be stored under cooling in order to avoid titer losses. La vacuna asociada a células cepa CVI 988, que es el componente activo de varias vacunas comerciales contra Marek, normalmente se congela y almacena en nitrógeno líquido. Con la finalidad de asegurar la eficacia adecuada de la vacuna, es crucial que se sigan los procedimientos idóneos para descongelar y diluir el virus. En este estudio, se tomaron ampolletas de la vacuna congelada en nitrógeno líquido y se descongelaron en un baño de María a 27 C y en uno a 37 C, con y sin agitación. Se investigó el efecto del proceso de descongelación sobre el título del virus vivo. Muestras de la vacuna congelada fueron diluidas en diluyente mantenido a diferentes temperaturas y los títulos de virus vivo se determinaron inmediatamente después de la dilución y de la incubación de la vacuna diluida a diferentes temperaturas. Los resultados muestran que inmediatamente después de la descongelación en baño de María a 27 C y a 37 C con o sin agitación, todos los títulos de virus vivo para la cepa CVI 988 estuvieron en el mismo rango. Luego de la incubación del virus descongelado por 15 minutos a ambas temperaturas, los títulos de virus vivo permanecieron en el mismo rango. Después de 4 horas de incubación se observó disminución en los títulos de virus vivo. La titulación del virus vivo de la vacuna en diluyente a diferentes temperaturas reveló que los títulos más altos se obtuvieron con un diluyente a una temperatura de 30 C a 37 C y los títulos más bajos se obtuvieron en diluyente a una temperatura de 5 C. Adicionalmente, se evaluó una vacuna combinada con el virus CVI 988 asociado a células y el virus Herpes de pavo asociado a células. Para esta vacuna combinada, los títulos del virus Herpes de pavo de pavo también fueron los mas altos en el diluyente con una temperatura alta (por ejemplo, 37 C), mientras que los títulos para el virus CVI 988 fueron mas altos en diluyente con una temperatura de 22 C. Ambas cepas mostraron títulos relativamente bajos en diluyente a 5 C. Después de la incubación por varias horas de la vacuna diluida a las distintas temperaturas se realizaron nuevamente titulaciones de virus vivo. Los títulos de virus vivo fueron más estables con diluyente a una temperatura de 22 C. El virus vacunal diluido en diluyente a 37 C pudo estabilizarse colocando la vacuna diluida a 5 C inmediatamente después de la dilución. Mediante la evaluación de estos datos, se recomienda lo siguiente: Para descongelar la vacuna, se prefiere un baño de María a una temperatura aproximada de 27 C. Para diluir la vacuna, el diluyente debe utilizarse a una temperatura igual o mayor de 22 C. Si se diluye la vacuna en diluyente a temperaturas superiores a 22 C, la vacuna diluida debe almacenarse en frío para evitar pérdidas en el título.
URL:http://www.jstor.org/stable/27565679
Short Title:Avian Diseases
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