AVIS-IBIS

Birds of Indian Subcontinent

Optimum Conditions for the Turkey Lymphocyte Transformation Test

Publication Type:Journal Article
Year of Publication:1992
Authors:Barta, O, Barta, V, Domermuth, CH, Pierson, FW
Journal:Avian Diseases
Volume:36
Issue:2
Date Published:1992
ISBN Number:00052086
Keywords:Ardeidae, Butorides, Butorides striata, Meleagris, Meleagris gallopavo, Pavo, Phasianidae
Abstract:Optimum conditions for turkey lymphocyte transformation tests were determined. Thrice-washed turkey buffy-coat cells obtained after slow centrifugation (40 × g, 10 minutes) responded well to mitogenic stimulation. Turkey lymphocytes isolated on Ficoll-containing separation media largely lost their ability to respond to mitogens. Maximum responses were obtained with 2 × 107 lymphoid cells/ml. Responses to the mitogens were greatest when bovine fetal serum was used at a 2.5% concentration or pooled turkey serum and autologous plasma were used at a 1.25% concentration. Higher concentrations of turkey serum or plasma decreased the responses when sub-optimum doses of concanavalin-A (Con A) or phytohemagglutinin-P (PHA-P) were used. Serum-free cultures gave higher stimulation indices than cultures with serum only when sub-optimum doses of Con A or PHA-P were used. Optimum mitogen concentrations varied with individual birds, timing of the culture, temperature of incubation, and serum concentration in the cultures. Responses were usually greatest with final concentrations of 5 μg Con A/ml, 10 μg PHA-P/ml, and 20 μg pokeweed mitogen (PWM)/ml and when the cultures were incubated in 96-well microplates at 40 C in humidified air with 5% CO2 for 40-42 hours with pulsing with 3 H-thymidine during the final 16 hours of incubation. /// Se determinaron las condiciones óptimas para las pruebas de transformación de linfocitos en pavos. Los leucocitos obtenidos después de centrifugación lenta (40 × g, 10 minutos) lavados tres veces, respondieron bien a la estimulación con mitógenos. Linfocitos de pavo aislados en medio de separación con Ficoll perdieron en gran parte su capacidad de responder a los mitógenos. Las respuestas máximas se obtuvieron con 2 × 107 linfocitos por ml. Las respuestas a los mitógenos fueron más grandes cuando se usó suero fetal bovino a una concentración de 2.5% o cuando se mezclaron sueros de varios pavos con plasma autólogo, usándose a una concentración de 1.25%. Concentraciones más altas de suero de pavo o plasma disminuyeron la respuesta cuando se usaron dosis por debajo de las óptimas de concanavalina A o fitohemoaglutinina P. Los cultivos libres de suero dieron índices de estimulación más altos que los cultivos con suero, únicamente cuando se usaron dosis de concanavalina A o fitohemoaglutinina por debajo de las óptimas. Las concentraciones óptimas de mitógeno variaron individualmente con cada ave, con el tiempo del cultivo, temperatura de incubación y la concentración de suero en los cultivos. Las respuestas fueron en general más altas con concentraciones finales de 5 μg/ml de concanavalina A, 10 μg/ml de fitohemoaglutinina y 20 μg/ml de fitolaca; y cuando los cultivos fueron incubados en microplacas de 96 celdillas a 40 C en una atmósfera húmeda con 5% de CO2 durante 40-42 horas con exposición a timidina radioactiva durante las últimas 16 horas de incubación.
URL:http://www.jstor.org/stable/1591517
Short Title:Avian Diseases
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